الخطوة الأولى لتسويق CAR-T

المصدر: T&L Biotechnology تاريخ الإصدار: 2023-08-31

كطريقة جديدة للعلاج المناعي الفردي للأورام، CAR-T العلاج بالخلايا أظهرت إمكانات علاجية هائلة. ومع ذلك، فإن التشغيل التجاري يطرح تحديات جديدة. بالمقارنة مع المواد الكيميائية التقليدية، تنطوي المستحضرات الصيدلانية الحيوية "الحية" على قدر أكبر من عدم اليقين، والمشاكل المحتملة، والمخاطر. يجب على شركات الأدوية أولاً وضع مجموعة معقولة من مواصفات الاختبار لضمان سلامة وفعالية منتجات CAR-T. اليوم، دعونا نلقي نظرة على كيفية ضمان جودة منتجات CAR-T وتحقيق فائدة أفضل للمرضى.

1. قدرة تضخيم خلايا CAR-T في المختبر
يتطلب علاج خلايا CAR-T الحصول أولاً على الخلايا الليمفاوية التائية من جسم المريض، ثم تحويل المجالات المستهدفة لـ CAR من خلال تقنية التعديل الوراثي في ​​المختبر. تحتاج هذه العملية إلى التضخيم الكامل في نظام زراعة الخلايا للحصول على ما يكفي من خلايا CAR-T العلاجية. لذلك، فإن قدرة خلايا CAR-T على التضخيم في المختبر تحدد بشكل مباشر ما إذا كان يمكن الحصول على عدد الخلايا لتلبية احتياجات العلاج. يمكننا تقييم قدرة تضخيم منتجات خلايا CAR-T في المختبر من خلال العدد التراكمي للخلايا التي تم الحصول عليها من خلال أجيال متعددة من الزراعة، وزيادة تضخيم الخلايا، ووقت الزراعة اللازم لتحديد عدد الخلايا [1]. تعكس هذه المؤشرات تكاثر خلايا CAR-T وحيويتها، وهي أحد مؤشرات الأداء الرئيسية لتطوير تقنية خلايا CAR-T.

الشكل 1: عملية تضخيم خلايا CAR-T في المختبر

2. استمرار وجود خلايا CAR-T في الجسم الحي
يُعدّ بقاء خلايا CAR-T واستمرارها بعد الحقن مؤشرين مهمين على وظيفتها. ويمكن لخلايا CAR-T طويلة العمر أن تُسهم في القضاء على الورم لفترة أطول. عادةً ما نرصد بانتظام تغيرات في عدد خلايا CAR-T في الدم المحيطي من خلال علم الخلايا التدفقية لتقييم استمراريتها في الجسم الحي. وبشكل عام، يمكن رصدها بشكل مستمر لمدة تتراوح بين شهر وستة أشهر أو أكثر بعد الحقن. ويصل الكشف إلى ذروته عادةً بعد أسبوع إلى أسبوعين من الحقن. ومن الطبيعي أن ينخفض ​​عدد خلايا CAR-T بمرور الوقت. يجب أن تتمتع تركيبة خلايا CAR-T المثالية ببقاء لا يقل عن 3-6 أشهر في الجسم الحي، وبهذه الطريقة فقط يمكن ضمان تأثير علاجي مُرضٍ.

الشكل 2: الكشف المرتبط بالاستمرارية لخلايا CAR-T في الجسم الحي

3. أداء خلايا CAR-T في استهداف الورم
تتمثل الآلية الرئيسية لعلاج خلايا CAR-T في أن الخلايا الليمفاوية التائية قد تم الحصول عليها بألفة عالية لقدرتها على تحديد مستضدات سطح الورم بعد التعديل، لذا يجب أن تتمتع منتجات خلايا CAR-T بالقدرة على استهداف خلايا الورم. يمكننا الكشف عن التأثير القاتل لخلايا CAR-T على سلالات خلايا الورم التي تعبر عن مستضدات مستهدفة من خلال الاختبارات المعملية لتقييم أدائها في الاستهداف. بالإضافة إلى ذلك، يمكننا أيضًا الكشف عن تسلل خلايا CAR-T في أنسجة الورم من خلال قياس التدفق الخلوي في جسم المريض لمعرفة ما إذا كانت قادرة على دخول موقع الورم بكفاءة للقيام بوظيفة القتل [3]. يجب أن تكون خلايا CAR-T المثالية غنية جدًا في الورم.

4. النشاط السام لخلايا CAR-T
بعد أن تتعرف خلايا CAR-T على الأورام وتُنشّطها، تُطلق سايتوكينات وجسيمات سامة مختلفة لمهاجمة الخلايا السرطانية وقتلها. لذلك، يُمكننا الكشف عن مستويات إنترفيرون-γ، وTNF-α، والبيرفورين، والإنزيم الحبيبي، وغيرها من الجزيئات التي تُطلقها خلايا CAR-T لتقييم النشاط السام للخلايا وحالة تنشيطها في قتل الأورام [4]. في المختبر، يُمكننا الكشف عن محتوى السيتوكينات والسموم المذكورة أعلاه من خلال خلايا CAR-T المُزروعة بشكل مُشترك وخلايا الورم المُستهدفة. كما يُمكن لتجربة إزالة التحبب أن تعكس بشكل حدسي مستوى إطلاق خلايا CAR-T للبيرفورين والجرانوليز، وهما مؤشران مهمان لتقييم النشاط القاتل لنواتج خلايا CAR-T.

الشكل 4: الكشف عن قدرة خلايا CAR-T على قتل الخلايا المستهدفة

5. قدرة خلايا CAR-T على الذاكرة
يجب أن تتمتع خلايا CAR-T المثالية بذاكرة، أي أنها قادرة على تحقيق نشاط أقوى بعد التنشيط المتكرر والاستجابة لإشارات الورم بشكل أسرع [5]. يمكننا اكتشاف تأثيرات الذاكرة لخلايا CAR-T بتحفيزها عدة مرات في المختبر، مثل زيادة مستوى إطلاق السيتوكين وتعزيز نشاطها القاتل. بعد ضخ هذه الخلايا ذات الذاكرة في الجسم، يمكنها تحقيق تأثير قاتل أطول أمدًا وأقوى للأورام.

الشكل 5: الكشف عن استمرار خلايا CAR-T على المدى الطويل

6. تقييم سلامة علاج الخلايا التائية CAR-T

يتمثل الخطر الرئيسي للعلاج بخلايا CAR-T في احتمالية تسببه في متلازمة إطلاق السيتوكين الشديدة. لذلك، نحتاج إلى الكشف عن مستويات السيتوكينات المرتبطة بمتلازمة إطلاق السيتوكين، مثل IL-6 وIL-10 وIFN-γ، التي تنتجها خلايا CAR-T، وتقييم خطر تسبب العلاج بخلايا CAR-T في متلازمة إطلاق السيتوكين. بالإضافة إلى ذلك، من الضروري مراقبة الآثار الجانبية السامة الأخرى المحتملة.
تعكس هذه المؤشرات الأداءَ الرئيسي لخلايا CAR-T بشكل كامل، بما في ذلك قدرتها على التكاثر، واستهداف الأورام، ونشاطها السام، وثباتها، وسلامتها. فقط منتجات خلايا CAR-T التي تستوفي المتطلبات والمؤشرات المذكورة آنفًا يُمكنها أن تُحدث تأثيرًا فعالًا مضادًا للأورام في الممارسة السريرية. لذلك، من الضروري إنشاء نظام علمي ومعقول لتقييم الجودة، وإزالة العوائق التي تحول دون تطوير منتجات جاهزة للاستخدام لتطوير خلايا CAR-T عالية النشاط والجودة، وذلك لتحقيق الهدف طويل الأمد المتمثل في خفض التكاليف وتحسين فعالية العلاج في المستقبل، وإفادة المزيد من المرضى المحتاجين للعلاج.

توصية المنتج النجمي
باعتباره العلاج النجمي الأكثر شيوعًا حاليًا، تمت الموافقة على إدراج علاج CAR-T ضمن منتجات CAR-T الثالثة في الصين. وقد عززت شركات ومنصات CAR-T ذات الصلة وتيرة البحث والتطوير، وركزت بنشاط على تصميم منتجات متباينة. إلى جانب تنافس بعض الشركات على أداء سلامة المنتجات، من الضروري للشركات المعنية خفض التكاليف وزيادة الكفاءة، كما سيصبح الاستبدال المحلي هو الطريق الرئيسي للتنمية الصناعية. حبة مغناطيسيةتُعدُّ الخلايا الجذعية موادَّ خامًا مهمةً لتحضير خلايا CAR-T، ولها دورٌ بالغ الأهمية في فصل وتنشيط الخلايا التائية. يُدمج منتج تونغليهايوان ActSep ® CD3/CD28 المغناطيسي للفصل والتنشيط (رقم المنتج: GMP-TL603) وظائف الفصل والتنشيط لتحقيق فصل وتنشيط وتضخيم الخلايا التائية بكفاءة. وهو مناسبٌ للتطبيقات ذات الصلة بالخلايا التائية البشرية، وخلايا CAR-T، وغيرها من مزارع الخلايا التائية. علاوةً على ذلك، أكمل المنتج ملف DMF من النوع الثاني لدى إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (رقم الملف: 038124)، مما يدعم تسجيل وإعلان الأدوية الخلوية.

حبات مغناطيسية ActSep® CD3/CD28 للفصل والتنشيط

1. مستوى استنفاد الخلايا التائية

تم الكشف عن مستويات التعبير الجيني لـ LAG3 وPD1 بعد 14 يومًا من زراعة الخلايا التائية النشطة، وذلك بنسب مختلفة لإضافة الخرز المغناطيسي. يُشبه ActSep® بشكل أساسي مستويات المنافسين. يكون مؤشر التعبير الجيني لـ ActSep® أقل عند نسبة 3:1 من الخرز المغناطيسي إلى الخلية. بالإضافة إلى ذلك، فإن إزالة الخرز المغناطيسي في اليوم الخامس يُقلل بشكل أكبر من مستوى استنزاف الخلايا التائية.

2. تحليل النوع الفرعي للخلايا التائية

كشف تغيرات الأنواع الفرعية للخلايا التائية في نقاط زراعة مختلفة بعد تنشيط فصل ActSep®. تزداد نسبة Tcm أثناء عملية الزراعة، وتزداد نسبة Teff إلى Tem مع زيادة مدة الزراعة.

حول T&L
شركة T&L للتكنولوجيا الحيوية المحدودة، التي تأسست عام ٢٠١١، تُركز على البحث والتطوير للمواد الخام والكواشف المُصنّعة وفقًا لممارسات التصنيع الجيدة (GMP) المستخدمة في العلاج الخلوي والجينيّ. نلتزم بتوفير منتجات وخدمات موثوقة لعلوم الحياة.