CAR-T વ્યાપારીકરણનું પ્રથમ પગલું

સ્ત્રોત: T&L બાયોટેકનોલોજી પ્રકાશન સમય: 2023-08-31

વ્યક્તિગત ગાંઠ ઇમ્યુનોથેરાપીની નવી પદ્ધતિ તરીકે, CAR-T સેલ થેરાપી મહાન ઉપચારાત્મક ક્ષમતા દર્શાવી છે. જો કે, વ્યાપારી કામગીરીનો અર્થ નવા પડકારો છે. પરંપરાગત રસાયણોની તુલનામાં, "જીવંત" બાયોફાર્માસ્યુટિકલ્સમાં વધુ અનિશ્ચિતતા, સંભવિત સમસ્યાઓ અને જોખમો હોય છે, ફાર્માસ્યુટિકલ કંપનીઓએ CAR-T ઉત્પાદનોની સલામતી અને અસરકારકતા સુનિશ્ચિત કરવા માટે પહેલા પરીક્ષણ સ્પષ્ટીકરણોનો વાજબી સમૂહ ઘડવો જોઈએ. આજે, ચાલો જોઈએ કે CAR-T ઉત્પાદનોની ગુણવત્તા કેવી રીતે સુનિશ્ચિત કરવી અને દર્દીઓને વધુ સારો લાભ કેવી રીતે આપવો.

૧. CAR-T કોષ પ્રવર્ધન ક્ષમતા ઇન વિટ્રો
CAR-T સેલ થેરાપી માટે પહેલા દર્દીના શરીરમાંથી T લિમ્ફોસાઇટ્સ મેળવવાની જરૂર પડે છે, અને પછી ઇન વિટ્રો ટ્રાન્સજેનિક ટેકનોલોજી દ્વારા CAR લક્ષિત ડોમેન્સને ટ્રાન્સડ્યુસ કરવાની જરૂર પડે છે. પૂરતા ઉપચારાત્મક CAR-T કોષો મેળવવા માટે આ પ્રક્રિયાને સેલ કલ્ચર સિસ્ટમમાં સંપૂર્ણપણે વિસ્તૃત કરવાની જરૂર છે. તેથી, CAR-T કોષોની ઇન વિટ્રો એમ્પ્લીફિકેશન ક્ષમતા સીધી રીતે નક્કી કરે છે કે સારવારની જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરવા માટે કોષોની સંખ્યા મેળવી શકાય છે કે નહીં. આપણે સંસ્કૃતિની બહુવિધ પેઢીઓ દ્વારા મેળવેલા કોષોની સંચિત સંખ્યા, સેલ એમ્પ્લીફિકેશનમાં વધારો અને કોષોની સંખ્યા સેટ કરવા માટે જરૂરી કલ્ચર સમય દ્વારા CAR-T સેલ ઉત્પાદનોની ઇન વિટ્રો એમ્પ્લીફિકેશન ક્ષમતાનું મૂલ્યાંકન કરી શકીએ છીએ [1]. આ સૂચકાંકો CAR-T કોષોના પ્રસાર અને જીવનશક્તિને પ્રતિબિંબિત કરે છે, અને CAR-T સેલ ટેકનોલોજીના વિકાસ માટે મુખ્ય પ્રદર્શન સૂચકાંકોમાંનું એક છે.

આકૃતિ 1: CAR-T કોષ પ્રવર્ધન પ્રક્રિયા ઇન વિટ્રો

2. વિવોમાં CAR-T કોષોની ટકાઉપણું
ઇન્ફ્યુઝન પછી CAR-T કોષોનો અસ્તિત્વ સમય અને સ્થાયીતા પણ કાર્યના મહત્વપૂર્ણ સૂચક છે. લાંબા સમય સુધી જીવિત CAR-T કોષો વધુ સ્થાયી ગાંઠ નાશક અસર ભજવી શકે છે. અમે સામાન્ય રીતે ફ્લો સાયટોલોજી દ્વારા પેરિફેરલ રક્તમાં CAR-T કોષોની સંખ્યામાં ફેરફાર નિયમિતપણે શોધી કાઢીએ છીએ જેથી તેમની સ્થાયીતાનું મૂલ્યાંકન કરી શકાય. સામાન્ય રીતે, ઇન્ફ્યુઝન પછી સતત 1-6 મહિના કે તેથી વધુ સમય સુધી તે શોધી શકાય છે. ટોચની શોધ સામાન્ય રીતે ઇન્ફ્યુઝન પછી 1-2 અઠવાડિયા પછી થાય છે. સમય જતાં CAR-T કોષોની સંખ્યામાં ઘટાડો થવો સામાન્ય છે. આદર્શ CAR-T કોષોના ફોર્મ્યુલેશનમાં ઓછામાં ઓછા 3-6 મહિનાનો અસ્તિત્વ સમય હોવો જોઈએ, ફક્ત આ રીતે સંતોષકારક ઉપચારાત્મક અસર સુનિશ્ચિત કરી શકાય છે.

આકૃતિ 2: વિવોમાં CAR-T કોષોની દ્રઢતા-સંબંધિત શોધ

3. CAR-T કોષોના ગાંઠ લક્ષ્ય પ્રદર્શન
CAR-T સેલ થેરાપીની મુખ્ય પદ્ધતિ એ છે કે T લિમ્ફોસાઇટ્સને ફેરફાર પછી ગાંઠની સપાટી-વિશિષ્ટ એન્ટિજેન્સ ઓળખવાની ક્ષમતા માટે ઉચ્ચ આકર્ષણ પ્રાપ્ત થયું છે, તેથી CAR-T સેલ ઉત્પાદનોમાં ગાંઠ કોષોને લક્ષ્ય બનાવવાની ક્ષમતા હોવી જોઈએ. આપણે ઇન વિટ્રો દ્વારા લક્ષિત એન્ટિજેન્સ વ્યક્ત કરતી ગાંઠ કોષ રેખાઓ પર CAR-T કોષોની હત્યા અસર શોધી શકીએ છીએ જેથી તેમના લક્ષ્યીકરણ પ્રદર્શનનું મૂલ્યાંકન કરી શકાય. વધુમાં, આપણે દર્દીના શરીરમાં ફ્લો સાયટોમેટ્રી દ્વારા ગાંઠ પેશીઓમાં CAR-T કોષોના ઘૂસણખોરીને પણ શોધી શકીએ છીએ જેથી તે અસરકારક રીતે ગાંઠના સ્થળે પ્રવેશી શકે છે કે કેમ તે જોવા માટે [3]. આદર્શ CAR-T કોષો ગાંઠમાં ખૂબ સમૃદ્ધ હોવા જોઈએ.

4. CAR-T કોષોની સાયટોટોક્સિક પ્રવૃત્તિ
CAR-T કોષો ગાંઠોને ઓળખી અને સક્રિય કર્યા પછી, તેઓ ગાંઠ કોષો પર હુમલો કરવા અને મારવા માટે વિવિધ સાયટોકાઇન્સ અને સાયટોટોક્સિક કણો છોડશે. તેથી, આપણે ગાંઠોને મારવાની સાયટોટોક્સિક પ્રવૃત્તિ અને સક્રિયકરણ સ્થિતિનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે CAR-T કોષો દ્વારા પ્રકાશિત IFN-γ, TNF-α, પરફોરિન, દાણાદાર એન્ઝાઇમ અને અન્ય અણુઓના સ્તરો શોધી શકીએ છીએ [4]. ઇન વિટ્રોમાં, આપણે કો-કલ્ચર્ડ CAR-T કોષો અને લક્ષ્ય ગાંઠ કોષો દ્વારા ઉપરોક્ત સાયટોકાઇન્સ અને ઝેરની સામગ્રી શોધી શકીએ છીએ. ડિગ્રેન્યુલેશન પ્રયોગ પરફોરિન અને ગ્રાન્યુલેઝ મુક્ત કરતા CAR-T કોષોના સ્તરને પણ સાહજિક રીતે પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે, જે CAR-T કોષો ઉત્પાદનોની હત્યા પ્રવૃત્તિનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે મહત્વપૂર્ણ સૂચક છે.

આકૃતિ 4: લક્ષ્ય કોષોને મારવા માટે CAR-T કોષોની ક્ષમતાની શોધ

5. CAR-T કોષોની યાદશક્તિ ક્ષમતા
આદર્શ CAR-T કોષોમાં મેમરી ફંક્શન પણ હોવું જોઈએ, એટલે કે તેઓ વારંવાર સક્રિય થયા પછી વધુ મજબૂત પ્રવૃત્તિ પ્રાપ્ત કરી શકે છે અને ગાંઠના સંકેતોનો ઝડપથી પ્રતિસાદ આપી શકે છે [5]. આપણે CAR-T કોષોને ઇન વિટ્રોમાં ઘણી વખત ઉત્તેજીત કરીને તેમની મેમરી અસરો શોધી શકીએ છીએ, જેમ કે સાયટોકાઇન પ્રકાશનનું સ્તર વધારવું અને હત્યા પ્રવૃત્તિમાં વધારો કરવો. મેમરી ક્ષમતા ધરાવતા આ CAR-T કોષને શરીરમાં દાખલ કર્યા પછી, તે ગાંઠો પર લાંબા સમય સુધી ચાલતી અને મજબૂત હત્યા અસર પ્રાપ્ત કરી શકે છે.

આકૃતિ 5: CAR-T કોષોની લાંબા ગાળાની દ્રઢતા શોધ

6. CAR-T સેલ થેરાપીનું સલામતી મૂલ્યાંકન

CAR-T સેલ થેરાપીનું મુખ્ય જોખમ એ છે કે તે ગંભીર સાયટોકાઇન રિલીઝ સિન્ડ્રોમનું કારણ બની શકે છે. તેથી આપણે CAR-T કોષો દ્વારા ઉત્પાદિત IL-6, IL-10 અને IFN-γ જેવા CRS-સંબંધિત સાયટોકાઇન્સના સ્તરને શોધવાની જરૂર છે, અને CAR-T સેલ થેરાપી CRS નું કારણ બની શકે છે તે જોખમનું મૂલ્યાંકન કરવાની જરૂર છે. વધુમાં, અન્ય સંભવિત ઝેરી આડઅસરોનું નિરીક્ષણ કરવું જરૂરી છે.
આ સૂચકાંકો CAR-T કોષોના મુખ્ય પ્રદર્શનને સંપૂર્ણપણે પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે, જેમાં પ્રસાર ક્ષમતા, ગાંઠ લક્ષ્યીકરણ, સાયટોટોક્સિક પ્રવૃત્તિ, દ્રઢતા અને સલામતીનો સમાવેશ થાય છે. ઉપરોક્ત આવશ્યકતાઓ અને સૂચકાંકોને એકસાથે પૂર્ણ કરતા CAR-T કોષોના ઉત્પાદનો જ ક્લિનિકલ પ્રેક્ટિસમાં વાસ્તવિક એન્ટિ-ટ્યુમર અસર ભજવી શકે છે. તેથી, ઉચ્ચ-પ્રવૃત્તિ અને ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા CAR-T કોષોના ઉત્પાદનો વિકસાવવા માટે વૈજ્ઞાનિક અને વાજબી ગુણવત્તા મૂલ્યાંકન પ્રણાલી સ્થાપિત કરવી અને ઉપયોગ માટે તૈયાર ઉત્પાદનોના વિકાસમાં અવરોધો દૂર કરવા જરૂરી છે, જેથી લાંબા ગાળાના ધ્યેય પ્રાપ્ત કરી શકાય જે ખર્ચ ઘટાડે છે અને ભવિષ્યમાં સારવારની અસરકારકતામાં સુધારો કરે છે, અને સારવારની જરૂર હોય તેવા વધુ દર્દીઓને લાભ મળે છે.

સ્ટાર ઉત્પાદન ભલામણ
હાલમાં સૌથી લોકપ્રિય સ્ટાર થેરાપી તરીકે, CAR-T થેરાપીને ચીનમાં ત્રીજા CAR-T ઉત્પાદન સાથે સૂચિબદ્ધ કરવા માટે મંજૂરી આપવામાં આવી છે. સંબંધિત CAR-T સાહસો અને પ્લેટફોર્મ્સે સંશોધન અને વિકાસની ગતિને ઝડપી બનાવી છે અને વિવિધ લેઆઉટ પર સક્રિયપણે ધ્યાન કેન્દ્રિત કર્યું છે. કેટલાક સાહસો ઉત્પાદન સલામતી કામગીરી માટે સ્પર્ધા કરવા ઉપરાંત, સંબંધિત સાહસો માટે ખર્ચ ઘટાડવા અને કાર્યક્ષમતા વધારવા હિતાવહ છે, અને સ્થાનિક અવેજી પણ ઔદ્યોગિક વિકાસનો મુખ્ય માર્ગ બનશે. રોગપ્રતિકારક શક્તિ ચુંબકીય મણકોCAR-T કોષોની તૈયારી માટે s મહત્વપૂર્ણ કાચો માલ છે, અને T કોષોના વિભાજન અને સક્રિયકરણ પ્રક્રિયામાં ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે. Tonglihaiyuan GMP સ્તરનું ઉત્પાદન ActSep ® CD3/CD28 વિભાજન અને સક્રિયકરણ ચુંબકીય મણકા (આઇટમ નંબર: GMP-TL603) T કોષોના વિભાજન, સક્રિયકરણ અને પ્રવર્ધનને કાર્યક્ષમ રીતે પ્રાપ્ત કરવા માટે વિભાજન અને સક્રિયકરણ કાર્યોને એકીકૃત કરે છે. તે માનવ T કોષો, CAR-T અને અન્ય T-સેલ સંસ્કૃતિના સંબંધિત એપ્લિકેશનો માટે યોગ્ય છે. વધુમાં, અને ઉત્પાદને US FDA (ફાઇલિંગ નંબર: 038124) સાથે DMF પ્રકાર II ફાઇલિંગ પૂર્ણ કર્યું છે, જે સેલ્યુલર દવાઓની નોંધણી અને ઘોષણાને સમર્થન આપે છે.

ActSep® CD3/CD28 વિભાજન અને સક્રિયકરણ ચુંબકીય મણકા

૧.ટી-કોષ થાક સ્તર

LAG3 અને PD1 ના અભિવ્યક્તિ સ્તરો T-સેલ સક્રિયકરણ સંસ્કૃતિ પછી 14 દિવસ પછી અલગ અલગ ચુંબકીય મણકાના ઉમેરણ ગુણોત્તર સાથે શોધી કાઢવામાં આવે છે. ActSep® મૂળભૂત રીતે સ્પર્ધકોના અભિવ્યક્તિ જેટલું જ છે. ActSep® થાક સૂચકાંકની અભિવ્યક્તિ 3:1 ચુંબકીય મણકાના ગુણોત્તર હેઠળ કોષ કરતાં ઓછી છે. વધુમાં, દિવસ 5 પર ચુંબકીય મણકા દૂર કરવાથી T કોષોના થાક સ્તરમાં વધુ ઘટાડો થશે.

2. ટી-કોષ પેટાપ્રકાર વિશ્લેષણ

ActSep® વિભાજન સક્રિયકરણ પછી વિવિધ સંસ્કૃતિ બિંદુઓ પર ટી-કોષ પેટાપ્રકારોમાં થતા ફેરફારો શોધો. ખેતી પ્રક્રિયા દરમિયાન Tcm નું પ્રમાણ વધે છે, અને ખેતી સમયના વિસ્તરણ સાથે Teff અને Tem નું પ્રમાણ વધે છે.

ટી એન્ડ એલ વિશે
૨૦૧૧ માં સ્થપાયેલ ટી એન્ડ એલ બાયોટેકનોલોજી લિમિટેડ, સેલ અને જનીન ઉપચાર (CGT) ના અપસ્ટ્રીમ GMP ગ્રેડ કાચા માલ અને રીએજન્ટ્સના સંશોધન અને વિકાસ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરે છે. અમે જીવન વિજ્ઞાન માટે વિશ્વસનીય ઉત્પાદનો અને સેવાઓ પ્રદાન કરવા માટે પ્રતિબદ્ધ છીએ.