د هیماتوپویټیک سټیم سیل کلتور کې دخیل پروټین فکتورونو لنډیز

سرچینه: د T&L بایو ټیکنالوژي د خپریدو وخت: 2023-07-13

پېژندنه
په وروستیو کلونو کې، د تنې حجرهپه کلینیکي غوښتنلیکونو کې په پراخه کچه کارول شوي دي. په هرصورت، د انسان په بدن کې د سټیم حجرو تناسب او مقدار خورا ټیټ دی، کوم چې نشي کولی کلینیکي اړتیاوې پوره کړي. له همدې امله، د سټیم حجرو پراختیا او کښت په زیاتیدونکي توګه مهم شوی دی. د اخلاقي او تخنیکي دلایلو له امله، د سټیم حجرو درملنه لاهم له ډیرو ستونزو سره مخ ده. د هیماتوپویټیک سټیم / پروجینیټر حجرو او د وینې حجرو مختلف نسبونو سطحي نښه کونکي نسبتا روښانه دي، او د حجرو فینوټایپیک ځانګړتیاوې په کمیتي ډول غوره کیدی شي، جلا کیدی شي، او د دوی دندې نسبتا وړیا کیدی شي، پرته له دې چې د اعصابو، رګونو، او جراحي لیږد لپاره د "بیولوژیکي سکفولډز" په څیر پیچلي جریان پروسو ته اړتیا ولري. له همدې امله، دا د سټیم حجرو پراختیا او توپیر لپاره غوره ماډل دی، او د مستقیم کلینیکي کارونې لپاره هم اسانه دی.
د هیماتوپویټیک سټیم حجرات د ځان نوي کولو او څو اړخیز توپیر وړتیا لوړه کچه لري. دوی کولی شي د وینې ټول بالغ حجرات تولید کړي، لکه د وینې سره حجرات، سپینې وینې حجرات، پلیټلیټونه، او لیمفوسایټس، او کولی شي ټول هیماتوپویټیک سیسټم بیا جوړ کړي. د هیماتوپویټیک سټیم حجرو د ویټرو پراختیا د دوی د ځان نوي کولو وړتیا ساتلو ته اړتیا لري پداسې حال کې چې د دوی توپیر مخه نیسي، دا یو خورا ننګونکی ټیکنالوژي جوړوي. په وروستیو کلونو کې، ډیری تجربو ښودلې چې د هیماتوپویټیک سټیم حجرو توپیر په سایټوکینونو پورې اړه لري. موږ به په لنډ ډول هغه عوامل او د دوی اغیزې لنډیز کړو چې د هیماتوپویټیک سټیم حجرو کلتور کې کارول کیږي.

د سټیم حجرو فکتور (SCF)
د سټیم سیل فاکتور (SCF) یو فاکتور دی چې د ټولو HSCs په سطحه د ټایروسین ریسیپټر c-Kit د لنگر کولو او څرګندولو له لارې عمل کوي. د c-Kit نیمګړتیا څرګندونه د HSC پراختیا شمیر کمولو لامل کیږي. اوس مهال، نږدې ټول سایټوکین ترکیبونه چې د HSC کلتور تجربو کې کارول کیږي SCF لري. سربیره پردې، SCF او FL3 دواړه د ټایروسین کایناس ریسیپټر TKR کورنۍ پورې اړه لري، کوم چې د لومړني هیماتوپویټیک حجرو پراخولو باندې همغږي اغیزه لري. د ځانګړي TKR سره تړلو سره، SCF حجرو ته سیګنالونه لیږدوي، د پروجینټر حجرو لومړني ویش او پراختیا پیل کوي، حجرو ته اجازه ورکوي چې د G0 مرحلې بشپړولو وروسته د اپوپټوسس پراختیا پیل کړي او مخنیوی وکړي.

ترومبوپویټین (ټي پي او)
په پیل کې داسې انګیرل کیده چې TPO د میګاکاریوسایټونو لپاره د ودې یو ځانګړی فکتور دی، چې د ځانګړو فعالو سایټوکینونو کټګورۍ پورې اړه لري چې کولی شي په میګاکاریوسایټونو کې د فعال پلیټلیټونو پراختیا، توپیر، پختګي، ویش او جوړښت وساتي. دا د میګاکاریوسایټونو پراخولو لپاره غوره فکتور دی. په وروستیو کلونو کې، تجربو تایید کړې چې TPO د ویټرو مطالعاتو کې د HSC پراختیا هڅولو کې مهم رول لوبوي، او کله چې د نورو سایټوکینونو سره یوځای شي، دا کولی شي د کالوني جوړولو واحدونو ټول شمیر او د CD34+ سټیم حجرو پراختیا فولډ زیات کړي. په ځانګړې توګه د FL3 ترکیبونو کې، دا کولی شي د اوږدې مودې وده او د سینې د وینې CD34+ سټیم حجرو پراختیا وساتي.

انټرلیوکین-۳ (IL-۳)
انټرلیوکین-۳ (IL-۳)، چې د ماس په نوم هم پیژندل کیږيټي حجره د ودې فکتور، یو پلیوټروپیک سایټوکین دی چې په عمده توګه د فعال شوي T لیمفوسایټس لخوا تولید کیږي، کوم چې کولی شي د پلوریپوټینټ HSCs او مختلف نسب لرونکي پروجینیټر حجرو تکثیر او توپیر هڅوي. د سټیم حجرو سطحې ریسیپټرونو د IL-3 هڅول شوي هیټروډیمرائزیشن وروسته، دوی کولی شي د ډیری سیګنال لیږد پروټینونو سره وصل شي، لکه د جانوس کایناس سیګنالینګ ټرانسډوسر او ټرانسکرپشنل ایکټیویټر (JAK/STAT) لاره، په دې توګه د سیګنال کم شوی جریان هڅوي او د سټیم حجرو پراختیا تنظیم کې برخه اخلي. IL-3 کولی شي د خارجي حجرو سیګنال تنظیم شوی کایناس (ERK) لاره او د c-jun امینوټرانسفیریز (JNK) لاره هم فعاله کړي، د سټیم حجرو وده، پراختیا او بقا هڅوي.

انټرلیوکین-۶ (IL-6)
IL-6 یو څو اړخیزه سایټوکین دی چې د معافیت او التهابي غبرګونونو تنظیمولو سره د کوربه دفاع کې مهم رول لوبوي. IL-6 د T حجرو، مونوسایټونو، فایبروبلاستونو، انډوتیلیل حجرو، او کیراټینوسایټونو لخوا تولید کیږي، او ډیری بیولوژیکي دندې لري. دا کولی شي د B حجرو توپیر او انټي باډي تولید ته وده ورکړي، په همغږۍ سره IL-3 د میګاکاریوسایټونو او پلیټلیټ تولید په پراختیا کې رول لوبوي، په ځیګر کې د حاد پړاو پروټینونو څرګندونه هڅوي، او د هډوکي میټابولیزم تنظیموي. IL-6 د IL-6 ریسیپټر سیسټم له لارې سیګنالونه لیږدوي، کوم چې د دوو زنځیرونو څخه جوړ شوی دی: IL-6Rα او gp130. STAT3 د جنین سټیم حجرو د غیر توپیر شوي حالت ساتلو کې پریکړه کونکی مالیکول دی، پداسې حال کې چې IL-6 د JAK/STAT3 سیګنالینګ لارې لومړنی هڅونکی دی.

LFLT3 لیګنډ (FL)
FLT3 لیګنډ د ودې یو فکتور دی چې د لومړني هیماتوپویټیک حجرو پراختیا تنظیموي. FLT3 لیګنډ د ټیروسین کایناز ریسیپټر FLT3 څرګندولو حجرو سره تړلی دی. FLT3 لیګنډ پخپله د لومړني هیماتوپویټیک حجرو پراختیا نه هڅوي، بلکه په همغږۍ سره د نورو CSFs او انټرلیوکینونو سره وده او توپیر هڅوي. د SCF برعکس، FLT3 لیګنډ په ماسټ حجرو هیڅ اغیزه نلري. د FLT3 لیګنډ ډیری فرعي ډولونه پیژندل شوي. اصلي بایو اکټیو بڼه د حجرو په سطحه د ټرانس میمبرین پروټین (209a) د خارجي حجروي ډومین په توګه لنگر شوی. د غشا سره تړلی ایزومر د پروټینونو لخوا مات کیدی شي ترڅو بیولوژیکي فعال محلول ایزومرونه تولید کړي.

د FMS-چینایي شرابو ۳
د FMS-liketyrosine kinease 3 (FL3) چې په CD34+CD38dim حجرو کې په لوړه کچه څرګند شوی، حجرو ته سیګنالونه لیږدوي او د دوی ځانګړي ټایروسین کایناز فعال ریسیپټرونو (TKRs) سره تړل کیږي. FL3 په HSC/HPC باندې عمل کوي او د حجرو په سطحه د TKR سره تړلو سره د هیماتوپویټیک تنظیم پلي کوي. FL3 هم د لومړني پروجینیټر حجرو هڅونکی فاکتور دی، کوم چې د HSC/HPC په ان ویټرو پراختیا کې د پام وړ هڅونکي اغیزه لري. دا کولی شي د ان ویټرو پراختیا په جریان کې د CD34+ سټیم حجرو د تدریجي توپیر او HPC کمولو مخه ونیسي.

د ودې بدلون فکتور - β
د ودې د بدلون عامل - β، د ودې د بدلون عامل - β 1 β 2 او β 3 فرعي ډولونه د تی لرونکو ژوو د ورته ریسیپټر له لارې سیګنالونه خپروي، چې ورته بیولوژیکي غبرګونونه رامینځته کوي. دا څو اړخیز سایټوکینونه دي چې د حجرو پراختیا، وده، توپیر، او حرکت تنظیموي، او همدارنګه د خارجي حجرو میټریکس ترکیب او جمع کول. د ودې د بدلون عامل - β (TGF- β) د هډوکي میرو سټرومل حجرو لخوا تولید کیږي. دا د S مرحلې ته د ننوتلو څخه د لومړني HSC/HPC مخه نیسي، چې ډیری HSC/HPC د G0 مرحلې کې وي.

د میکروفیج التهابي پروټین - 1 α
د میکروفیج التهابي پروټین-1β (MIP-1β) د MIP-1α طبیعي مخالف دی، کوم چې ورسره مل وي. دا کولی شي د HSC/HPC په لومړیو کې د MIP-1α مخنیوي اغیز کم کړي او HSC د آرام حالت ته د بیرته راستنیدو مخه ونیسي.

پي ۳۸
P38، د مایټوجن فعال پروټین کایناز (MAPK) کورنۍ پورې اړوند د سیګنال مالیکول په توګه، د نورموکسیک شرایطو لاندې د HSCs د ان ویټرو پراختیا مخه نیسي. تجربو ښودلې چې کله HSCs د TPO، SCF، او FL3 لرونکي سیرم فری کلچر میډیا کې اضافه شي، اکسیډیټیو فشار p38 او p16 فعالوي، چې د موږک HSCs په شمیر کې د پام وړ کمښت لامل کیږي.

د ګرانولوماکروفاج کالوني هڅونکی فکتور (GM-CSF)
د ګرانولوسایټ میکروفیج کالوني محرک فاکتور یو درمل دی چې په کلینیکي ډول د لیوکوپینیا یا ګرانولوسایټوپینیا د مختلفو لاملونو لپاره کارول کیږي. د حجرو د متحرک کولو اوسنی اجنټ د ګرانولوسایټ میکروفیج کالوني محرک فاکتور (GM-CSF) دی، کوم چې نه یوازې په پردیي وینه کې د هیماتوپویټیک سټیم حجرو شمیر زیاتوي، بلکه د زړه فعالیت او نورو دندو کې هم مرسته کوي.

د ګرانولوسایټ کالوني محرک فکتور (G-CSF)
د ګرانولوسایټ کالوني هڅونکي فکتورونو اغیزې عموما د انټيجن پریزنټیشن، د میکروفیج فعالیت لوړول، او د هیماتوپویټیک سټیم حجرو پراختیا هڅول شامل دي. د ګرانولوسایټ کالوني هڅونکي فکتور د هډوکي میرو سټیم حجرو لپاره یو پیاوړی متحرک اجنټ دی، کوم چې کولی شي د اوټولوګس هډوکي میرو سټیم حجرو پراختیا هڅوي او د هډوکي میرو څخه یې پردیي وینې ته متحرک کړي.

اریتروپویټین (EPO)
اریتروپویټین (EPO) د هیماتوپویټیک توپیر کې اصلي محرک فاکتور دی، کوم چې کولی شي د هیماتوپویټیک سټیم حجرو توپیر په لومړني سره د وینې حجرو ته وده ورکړي، د ځوانو سره د وینې حجرو ویش او پراختیا ګړندۍ کړي، د هیموګلوبین ترکیب ته وده ورکړي، او همدارنګه د سره د وینې حجرو هڅول شوي توپیر په مطالعه کې مهم رول ولوبوي.
د هیماتوپویټیک سټیم حجرات د ځان نوي کولو او څو اړخیز توپیر وړتیا لري. د مختلفو فکتورونو ترکیب د هیماتوپویټیک سټیم حجرو په پراختیا کې مختلف اغیزې لري. د هیماتوپویټیک سټیم حجرو کارول کولی شي په انتخابي ډول د څو حجرو تولید هڅوي، کوم چې بې له شکه د NK حجرو د پراختیا لپاره نوي نظرونه چمتو کوي. اوس مهال، د NK حجرات د جنین سټیم حجرو او iPSCs څخه هڅول کیدی شي، مګر د جنین سټیم حجرو او هڅول شوي پلوریپوټینټ سټیم حجرو دواړه باید د NK حجرو کې توپیر کولو دمخه د هیماتوپویټیک سټیم حجرو ته واړول شي. له همدې امله، د هیماتوپویټیک سټیم حجرات پدې پروسه کې یو لازمي پل لوبوي. د سټیم حجرو څخه اخیستل شوي NK حجرو ګټې دا دي چې دوی د غوښتنې سره سم کارول کیدی شي، قوي همغږي، ټیټ سایټوکین خوشې کول، او قوي وژونکي فعالیت لري. له همدې امله، په بازار کې د سټیم حجرو څخه اخیستل شوي NK حجرو سپړلو لپاره لاهم لوړه لیوالتیا شتون لري. د NK حجرو ته د سټیم حجرو د شاملولو په اړه ادبیات شتون لري. موږ په عمده توګه په ادبیاتو کې ذکر شوي فکتورونو تمرکز کوو.

۱. د انسان د جنیني سټیم حجرو څخه اخیستل شوي NK حجرات

HESCs د مورین هډوکي میرو سټرومل حجرو لاین M210-B4 سره په متوسط ​​ډول چې RPMI 1640، 15٪ تعریف شوي جنین غواګانو سیرم، 2 mM L-glutamine، 1٪ غیر ضروري امینو اسیدونه، 1٪ پنسلین/سټریپټومیوسین، او 0.1 mM -mercaptoethanol پکې شامل وو، په هرو 2 څخه تر 3 ورځو کې د متوسط ​​بدلونونو سره لکه څنګه چې مخکې تشریح شوي، شریک کښت ته لیږدول شوي. د 17 څخه تر 20 ورځو وروسته، واحد حجروي تعلیق چمتو شو او CD34+CD45+ حجرې جلا شوې، لکه څنګه چې مخکې تشریح شوي. جلا شوي حجرات د مورین جنین جگر څخه اخیستل شوي سټرومل حجرو لاین AFT024 سره دوهم ګډ کلتور ته لیږدول شوي چې د ډولبیکو تعدیل شوي ایګل میډیم/هام F12، 20٪ تودوخې غیر فعال شوي انساني سیرم AB، 2 mM L-ګلوټامین، 1٪ پنسلین/سټریپټومیوسین، 5 ng/mL سوډیم سیلینایټ، 50μM ایتانولامین، 25μM -مرکاپټو ایتانول، 20 mg/mL اسکوربیک اسید، انټرلیوکین-3، سټیم سیل فاکتور، IL-15، Fms-like tyrosine kinase 3 ligand، او IL-7 د 1:2 مخلوط لري. حجرات په هرو 5 څخه تر 6 ورځو کې د نیم متوسط ​​بدلونونو له لارې تازه میډیم سره تغذیه شوي. د 30 څخه تر 35 ورځو په کلتور کې وروسته، حجرات راټول شوي، د 70-μm فلټر له لارې فلټر شوي، او د نورو تحلیل لپاره کارول شوي.

۲. د انسان د پلوریپوټینټ سټیم حجرو څخه اخیستل شوي NK حجرات

موږ د CD34+ CD45+ پروجینټر حجرو بډایه کولو لپاره د 18-21 ورځو حجرې راټولوو. یو لک CD34+ CD45+ حجرې د EL08-1D2 سټروما کې د 1 ملی لیتر NK حجرو پیل کونکي سایټوکینونو سره ځای په ځای شوي (IL-3، IL7، IL-15، سټیم سیل فاکتور، او fms-like tyrosine kinase receptor-3 ligand). د NK حجرو کلتورونه موږ په هرو 4-5 ورځو کې د 0.5 ملی لیتر سایټوکین لرونکي میډیم سره تازه کړل. د EL08-1D2 په 28-35 ورځو کلتور کې بالغ NK حجرې اندازه شوې.

د T&L سټیم سیل پورې اړوند سایټوکینونه او د ودې فکتور

د T&L په اړه
د ټي اېنډ ایل بایو ټیکنالوژي لمیټډ، چې په ۲۰۱۱ کال کې تاسیس شو، د حجرو او جین درملنې (CGT) د اپسټریم GMP درجې خامو موادو او ریجنټونو په څیړنه او پراختیا تمرکز کوي. موږ د ژوند ساینس لپاره د باور وړ محصولاتو او خدماتو چمتو کولو ته ژمن یو.