CAR-T වාණිජකරණයේ පළමු පියවර
මූලාශ්රය: T&L ජෛව තාක්ෂණය නිකුත් කරන වේලාව: 2023-08-31
පුද්ගලාරෝපිත පිළිකා ප්රතිශක්තිකරණ ප්රතිකාරයේ නව ක්රමයක් ලෙස, CAR-T සෛල චිකිත්සාව විශිෂ්ට චිකිත්සක විභවයක් පෙන්නුම් කර ඇත. කෙසේ වෙතත්, වාණිජ ක්රියාකාරිත්වය යනු නව අභියෝග යන්නයි. සාම්ප්රදායික රසායනික ද්රව්ය හා සසඳන විට, "ජීවමාන" ජෛව ඖෂධවලට වැඩි අවිනිශ්චිතතාවයක්, විභව ගැටළු සහ අවදානම් ඇත, ඖෂධ සමාගම් පළමුව CAR-T නිෂ්පාදනවල ආරක්ෂාව සහ කාර්යක්ෂමතාව සහතික කිරීම සඳහා සාධාරණ පරීක්ෂණ පිරිවිතර මාලාවක් සකස් කළ යුතුය. අද, CAR-T නිෂ්පාදනවල ගුණාත්මකභාවය සහතික කර රෝගීන්ට වඩා හොඳ ප්රතිලාභ ලබා දෙන්නේ කෙසේදැයි බලමු.
1. CAR-T සෛල විස්තාරණ හැකියාව in vitro
CAR-T සෛල චිකිත්සාව සඳහා මුලින්ම රෝගියාගේ ශරීරයෙන් T ලිම්ෆොසයිට් ලබා ගැනීම අවශ්ය වන අතර, පසුව in vitro transgenic තාක්ෂණය හරහා CAR ඉලක්ක කරගත් වසම් සම්ප්රේෂණය කළ යුතුය. ප්රමාණවත් චිකිත්සක CAR-T සෛල ලබා ගැනීම සඳහා මෙම ක්රියාවලිය සෛල සංස්කෘතික පද්ධතිය තුළ සම්පූර්ණයෙන්ම විස්තාරණය කළ යුතුය. එබැවින්, CAR-T සෛලවල in vitro වර්ධන හැකියාව ප්රතිකාරයේ අවශ්යතා සපුරාලීම සඳහා සෛල ගණන ලබා ගත හැකිද යන්න කෙලින්ම තීරණය කරයි. බහු පරම්පරා සංස්කෘතියක් හරහා ලබාගත් සමුච්චිත සෛල ගණන, සෛල විස්තාරණය වැඩි වීම සහ සෛල ගණන සැකසීමට අවශ්ය සංස්කෘතික කාලය හරහා අපට CAR-T සෛල නිෂ්පාදනවල in vitro වර්ධන හැකියාව ඇගයීමට ලක් කළ හැකිය [1]. මෙම දර්ශක CAR-T සෛලවල ප්රගුණනය සහ ජීව ශක්තිය පිළිබිඹු කරන අතර, CAR-T සෛල තාක්ෂණය සංවර්ධනය කිරීම සඳහා ප්රධාන කාර්ය සාධන දර්ශකවලින් එකකි.
රූපය 1: CAR-T සෛල විස්තාරණ ක්රියාවලිය in vitro
2. සජීවීව CAR-T සෛලවල පැවැත්ම
CAR-T සෛල එන්නත් කිරීමෙන් පසු ඒවායේ පැවැත්මේ කාලය සහ නොනැසී පැවතීම ද ක්රියාකාරිත්වයේ වැදගත් දර්ශක වේ. දිගු කල් පවතින CAR-T සෛල වඩාත් කල් පවතින පිළිකා නාශක බලපෑමක් ඇති කළ හැකිය. අපි සාමාන්යයෙන් ප්රවාහ සෛල විද්යාව හරහා පර්යන්ත රුධිරයේ CAR-T සෛල ගණනෙහි වෙනස්කම් නිතිපතා හඳුනා ගනිමු, ඒවායේ පැවැත්ම in vivo තුළ තක්සේරු කරමු. සාමාන්යයෙන්, එය in vivo තුළ මාස 1-6 ක් හෝ ඊට වැඩි කාලයක් අඛණ්ඩව අනාවරණය කර ගත හැකිය. උපරිම හඳුනාගැනීම සාමාන්යයෙන් in vivo තුළ සති 1-2 කට පසුව සිදු වේ. කාලයත් සමඟ CAR-T සෛල ගණන අඩු වීම සාමාන්ය දෙයකි. කදිම CAR-T සෛල සූත්රගත කිරීම in vivo තුළ අවම වශයෙන් මාස 3-6 ක පැවැත්මේ කාලයක් තිබිය යුතුය, මේ ආකාරයෙන් පමණක් සතුටුදායක චිකිත්සක බලපෑමක් සහතික කළ හැකිය.
රූපය 2: සජීවීව CAR-T සෛලවල නොනැසී පැවතීම හා සම්බන්ධ හඳුනාගැනීම
3. CAR-T සෛලවල පිළිකා ඉලක්ක කිරීමේ කාර්ය සාධනය
CAR-T සෛල චිකිත්සාවේ ප්රධාන යාන්ත්රණය නම්, වෙනස් කිරීමෙන් පසු පිළිකා මතුපිට-විශේෂිත ප්රතිදේහජනක හඳුනා ගැනීමේ හැකියාව සඳහා T ලිම්ෆොසයිට් ඉහළ සම්බන්ධතාවයක් ලබාගෙන ඇති බැවින්, CAR-T සෛල නිෂ්පාදන පිළිකා සෛල ඉලක්ක කර ගැනීමේ හැකියාව පැහැදිලිව තිබිය යුතුය. ඉලක්කගත ක්රියාකාරිත්වය විනිශ්චය කිරීම සඳහා in vitro හරහා ඉලක්කගත ප්රතිදේහජනක ප්රකාශ කරන පිළිකා සෛල රේඛා මත CAR-T සෛලවල ඝාතන බලපෑම අපට හඳුනාගත හැකිය. ඊට අමතරව, රෝගියාගේ ශරීරයේ ප්රවාහ සයිටොමෙට්රි හරහා පිළිකා පටක තුළට CAR-T සෛල කාන්දු වීම ද අපට හඳුනාගත හැකි අතර, එය ඝාතක කාර්යයක් ඉටු කිරීම සඳහා පිළිකා ස්ථානයට කාර්යක්ෂමව ඇතුළු විය හැකිදැයි බැලීමට [3]. පරමාදර්ශී CAR-T සෛල පිළිකාව තුළ බෙහෙවින් පොහොසත් විය යුතුය.
4. CAR-T සෛලවල සයිටොටොක්සික් ක්රියාකාරිත්වය
CAR-T සෛල පිළිකා හඳුනාගෙන සක්රිය කිරීමෙන් පසු, ඒවා පිළිකා සෛල වලට පහර දී මරා දැමීමට විවිධ සයිටොකයින් සහ සයිටොටොක්සික් අංශු මුදා හරිනු ඇත. එබැවින්, පිළිකා විනාශ කිරීමේ සයිටොටොක්සික් ක්රියාකාරිත්වය සහ සක්රීය කිරීමේ තත්ත්වය ඇගයීම සඳහා CAR-T සෛල මගින් නිකුත් කරන IFN-γ, TNF-α, පර්ෆොරින්, කැටිති එන්සයිම සහ අනෙකුත් අණු මට්ටම් අපට හඳුනාගත හැකිය [4]. සම-සංස්කෘතික CAR-T සෛල සහ ඉලක්කගත පිළිකා සෛල මගින් ඉහත සයිටොකයින් සහ විෂ ද්රව්යවල අන්තර්ගතය අපට හඳුනාගත හැකිය. CAR-T සෛල නිෂ්පාදනවල ඝාතක ක්රියාකාරකම් ඇගයීම සඳහා වැදගත් දර්ශක වන පර්ෆොරින් සහ ග්රැනියුලේස් මුදා හරින CAR-T සෛල මට්ටම ද ඩිග්රැනියුලේෂන් අත්හදා බැලීම මගින් සහජයෙන්ම පිළිබිඹු කළ හැකිය.
රූපය 4: ඉලක්ක සෛල විනාශ කිරීමට CAR-T සෛලවල හැකියාව හඳුනා ගැනීම
5. CAR-T සෛලවල මතක හැකියාව
පරමාදර්ශී CAR-T සෛලවලට මතක ක්රියාකාරිත්වය ද තිබිය යුතුය, එනම් නැවත නැවත සක්රිය කිරීමෙන් පසු ඒවාට ශක්තිමත් ක්රියාකාරිත්වයක් ලබා ගත හැකි අතර පිළිකා සංඥා වලට වේගයෙන් ප්රතිචාර දැක්විය හැකිය [5]. සයිටොකයින් මුදා හැරීමේ මට්ටම වැඩි කිරීම සහ ඝාතන ක්රියාකාරකම් වැඩි දියුණු කිරීම වැනි, ඒවා කිහිප වතාවක් විට්රෝ තුළ උත්තේජනය කිරීමෙන් අපට CAR-T සෛලවල මතක බලපෑම් හඳුනාගත හැකිය. මතක හැකියාව ඇති මෙම CAR-T සෛලය ශරීරයට ඇතුළු කළ පසු, එය පිළිකා මත දිගුකාලීන හා ශක්තිමත් ඝාතන බලපෑමක් ලබා ගත හැකිය.
රූපය 5: CAR-T සෛල දිගුකාලීන නොනැසී පැවතීම හඳුනාගැනීම
6. CAR-T සෛල චිකිත්සාවේ ආරක්ෂිත ඇගයීම
CAR-T සෛල චිකිත්සාවේ ප්රධාන අවදානම වන්නේ දරුණු සයිටොකයින් මුදා හැරීමේ සින්ඩ්රෝමය ඇති කළ හැකි වීමයි. එබැවින් CAR-T සෛල මගින් නිපදවන IL-6, IL-10 සහ IFN-γ වැනි CRS ආශ්රිත සයිටොකයින් මට්ටම් අප විසින් හඳුනා ගත යුතු අතර, CAR-T සෛල චිකිත්සාව CRS ඇති කළ හැකි අවදානම තක්සේරු කළ යුතුය. ඊට අමතරව, අනෙකුත් විෂ සහිත අතුරු ආබාධ නිරීක්ෂණය කිරීම අවශ්ය වේ.
මෙම දර්ශක මගින් CAR-T සෛලවල ප්රධාන ක්රියාකාරිත්වය සම්පූර්ණයෙන්ම පිළිබිඹු කළ හැකි අතර, ප්රගුණන හැකියාව, පිළිකා ඉලක්ක කිරීම, සයිටොටොක්සික් ක්රියාකාරිත්වය, නොනැසී පැවතීම සහ ආරක්ෂාව ඇතුළත් වේ. ඉහත අවශ්යතා සහ දර්ශක එකවර සපුරාලන CAR-T සෛල නිෂ්පාදනවලට පමණක් සායනික භාවිතයේදී සැබෑ පිළිකා නාශක බලපෑමක් ඇති කළ හැකිය. එබැවින්, විද්යාත්මක හා සාධාරණ තත්ත්ව ඇගයීම් පද්ධතියක් ස්ථාපිත කිරීම සහ ඉහළ ක්රියාකාරීත්වයක් සහ උසස් තත්ත්වයේ CAR-T සෛල නිෂ්පාදන සංවර්ධනය කිරීම සඳහා භාවිතයට සූදානම් නිෂ්පාදන සංවර්ධනයට ඇති බාධක ඉවත් කිරීම අවශ්ය වේ, එවිට අනාගතයේදී පිරිවැය අඩු කර ප්රතිකාර කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කරන දිගුකාලීන ඉලක්කය සපුරා ගැනීමට සහ ප්රතිකාර අවශ්ය රෝගීන් වැඩි පිරිසකට ප්රතිලාභ සැලසීමට හැකි වේ.
තරු නිෂ්පාදන නිර්දේශය
වර්තමානයේ වඩාත් ජනප්රිය තරු චිකිත්සාව ලෙස, CAR-T චිකිත්සාව චීනයේ තුන්වන CAR-T නිෂ්පාදනය සමඟ ලැයිස්තුගත කිරීම සඳහා අනුමත කර ඇත. අදාළ CAR-T ව්යවසායන් සහ වේදිකා පර්යේෂණ හා සංවර්ධන වේගය වේගවත් කර ඇති අතර වෙනස් කළ පිරිසැලසුම කෙරෙහි ක්රියාකාරීව අවධානය යොමු කර ඇත. නිෂ්පාදන ආරක්ෂණ කාර්ය සාධනය සඳහා තරඟ කිරීමට අමතරව, අදාළ ව්යවසායන් සඳහා පිරිවැය අඩු කිරීම සහ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කිරීම අත්යවශ්ය වන අතර, දේශීය ආදේශනය කාර්මික සංවර්ධනය සඳහා ප්රධාන මාර්ගය බවට පත්වනු ඇත. ප්රතිශක්තිය චුම්භක පබළුCAR-T සෛල සකස් කිරීම සඳහා වැදගත් අමුද්රව්ය වන අතර, T සෛල වෙන් කිරීම සහ සක්රීය කිරීමේ ක්රියාවලියේදී ඉතා වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. Tonglihaiyuan GMP මට්ටමේ නිෂ්පාදනයක් වන ActSep ® CD3/CD28 වෙන් කිරීම සහ සක්රිය කිරීමේ චුම්භක පබළු (අයිතම අංකය: GMP-TL603) T සෛල වෙන් කිරීම, සක්රිය කිරීම සහ විස්තාරණය කාර්යක්ෂමව සාක්ෂාත් කර ගැනීම සඳහා වෙන් කිරීම සහ සක්රිය කිරීමේ කාර්යයන් ඒකාබද්ධ කරයි. එය මිනිස් T සෛල, CAR-T සහ අනෙකුත් T-සෛල සංස්කෘතියේ අදාළ යෙදුම් සඳහා සුදුසු වේ. එපමණක් නොව, සහ නිෂ්පාදනය US FDA (ගොනු කිරීමේ අංකය: 038124) සමඟ DMF වර්ගයේ II ගොනු කිරීම සම්පූර්ණ කර ඇති අතර, සෛලීය ඖෂධ ලියාපදිංචි කිරීම සහ ප්රකාශ කිරීම සඳහා සහාය වේ.
ActSep® CD3/CD28 වෙන් කිරීම සහ සක්රිය කිරීමේ චුම්භක පබළු
1.T-සෛල ක්ෂය වීමේ මට්ටම
විවිධ චුම්භක පබළු එකතු කිරීමේ අනුපාත සමඟ T-සෛල සක්රීය සංස්කෘතිය දින 14 කට පසුව LAG3 සහ PD1 හි ප්රකාශන මට්ටම් අනාවරණය වේ. ActSep® මූලික වශයෙන් තරඟකරුවන්ගේ ප්රකාශනයට සමාන වේ. ActSep ® ක්ෂය වීමේ දර්ශකයේ ප්රකාශනය සෛලයට 3:1 චුම්භක පබළු අනුපාතය යටතේ අඩු වේ. ඊට අමතරව, 5 වන දින චුම්භක පබළු ඉවත් කිරීම T සෛලවල ක්ෂය වීමේ මට්ටම තවදුරටත් අඩු කරනු ඇත.
2. T-සෛල උප වර්ග විශ්ලේෂණය
ActSep® වෙන් කිරීමේ සක්රිය කිරීමෙන් පසු විවිධ වගා ස්ථානවල T-සෛල උප වර්ගවල වෙනස්කම් හඳුනා ගන්න. වගා ක්රියාවලියේදී Tcm අනුපාතය වැඩි වන අතර, වගා කාලය දීර්ඝ වීමත් සමඟ Teff සහ Tem අනුපාතය වැඩි වේ.
T&L ගැන
2011 දී ආරම්භ කරන ලද T&L Biotechnology Ltd., සෛල හා ජාන චිකිත්සාවේ (CGT) උඩුගං බලා GMP ශ්රේණියේ අමුද්රව්ය සහ ප්රතික්රියාකාරක පර්යේෂණ සහ සංවර්ධනය කෙරෙහි අවධානය යොමු කරයි. ජීව විද්යාව සඳහා විශ්වාසදායක නිෂ්පාදන සහ සේවා සැපයීමට අපි කැපවී සිටිමු.