Aotelega o Mea Fa'apoloteina e A'afia i le Aganu'u Cell Stem Cell Hematopoietic

Punavai: T&L Biotechnology Taimi fa'alauiloa: 2023-07-13

Folasaga
I tausaga talu ai nei, Stem Cells ua fa'atuputeleina fa'aoga lautele i fa'aoga fa'afoma'i. Ae ui i lea, o le vaega ma le aofaʻi o stemcells i totonu o le tino o le tagata e matua maualalo lava, e le mafai ona faʻafetaui manaʻoga falemaʻi. O le mea lea, o le faʻalauteleina o le in vitro ma le faʻaleleia o sela o loʻo faʻateleina le taua. Ona o mafuaʻaga faʻale-aganuʻu ma faʻatekonolosi, o le togafitiga o sela o loʻo feagai pea ma le tele o faʻafitauli. O faʻailoga pito i luga ole hematopoietic stem / progenitor cell ma laina eseese o sela toto e matua manino lava, ma o uiga faʻapitoa o sela e mafai ona filifilia faʻatusatusa, tuʻueseese, ma o latou galuega e mafai ona fai fua, e aunoa ma le manaʻomia o faiga faʻalavelave i lalo e pei o "biological scaffolds" mo neura, vascular, ma taotoga taotoga. O le mea lea, o le faʻataʻitaʻiga sili lea mo le faʻalauteleina o le cell cell ma le eseesega, ma e faigofie foi mo le faʻaogaina saʻo o falemaʻi.
Hematopoietic stem cell ei ai le maualuga maualuga o le faʻafouina o le tagata lava ia ma le tele o mea e mafai ona faʻavasegaina. E mafai ona latou gaosia uma sela toto matutua, e pei o sela mūmū, sela paʻepaʻe, platelets, ma lymphocytes, ma e mafai ona toe fausia le tino atoa o le hematopoietic. In vitro fa'alautelega o sela o le hematopoietic stem e mana'omia ai le fa'atumauina o lo latou gafatia fa'afouina a'o puipuia fo'i lo latou fa'aeseesega, ma avea ai ma tekonolosi e sili ona lu'itau. I tausaga talu ai nei, o le tele o faʻataʻitaʻiga ua faʻaalia ai o le eseesega o sela o le hematopoietic e faalagolago i cytokines. O le a matou otootoina faʻapuupuu mea taua ma o latou aʻafiaga o loʻo faʻaaogaina i le aganuʻu o le hematopoietic stem cell culture.

Fa'amea ole sela (SCF)
Stem cell factor (SCF) o se mea e galue e ala i le taula ma faʻaalia le tyrosine receptor c-Kit i luga o HSC uma. Le fa'aaliga c-Kit fa'aletonu e mafua ai le fa'aitiitia o le numera o le fa'alauteleina o le HSC. I le taimi nei, toetoe lava o tuʻufaʻatasiga cytokine uma o loʻo faʻaaogaina i suʻega aganuʻu a le HSC o loʻo iai le SCF. E le gata i lea, o le SCF ma le FL3 e aofia i le tyrosine kinase receptor TKR aiga, lea ei ai se aafiaga synergistic i le faalauteleina o sela hematopoietic primitive. E ala i le fusifusia i le TKR patino, SCF e tuʻuina atu faʻailoga i sela, amataina vave vaevaega ma faʻalauteleina o sela tupuaga, faʻatagaina sela e amata faʻalauteleina ma faʻalavelave apoptosis pe a maeʻa le vaega G0.

Thrombopoietin(Tpo）
O le TPO na talitonu muamua o se mea faʻapitoa e tuputupu aʻe mo megakaryocytes, o loʻo i totonu o le vaega o cytokines galue faʻapitoa e mafai ona faʻatumauina le faʻalauteleina, eseesega, matua, vaevaeina, ma le faʻavaeina o platelets galue i megakaryocytes. O le mea sili lea mo le faʻalauteleina o megakaryocytes. I tausaga talu ai nei, o faʻataʻitaʻiga ua faʻamaonia ai o le TPO o loʻo i ai se sao taua i le faʻalauteleina o le HSC i suʻesuʻega in vitro, ma pe a tuʻufaʻatasia ma isi cytokines, e mafai ona faʻateleina le aofaʻi o iunite faʻavae ma le faʻalauteleina o gauga CD34 + stem cell. Aemaise lava ile FL3 tu'ufa'atasiga, e mafai ona fa'atumauina le tuputupu a'e umi ma le fa'alauteleina ole toto toto CD34+ sela.

Interleukin-3 (IL-3)
Interleukin-3 (IL-3), e lauiloa foi o le masT Cell o le tuputupu aʻe, o se cytokine pleiotropic e masani ona gaosia e lymphocytes T faʻagaoioia, lea e mafai ona faʻaosofia ai le faʻateleina ma le eseesega o HSCs pluripotent ma suʻesuʻega tupuaga eseese. A maeʻa ona faʻaosoina e le IL-3 le heterodimerization o le faʻaogaina o le cell cell surface, e mafai ona latou fusifusia i le tele o faʻaliliuga faʻailoga, e pei o le Janus kinase signaling transducer ma le transcriptional activator (JAK / STAT) ala, ma faʻaosofia ai le tafe o le faailoilo faʻaitiitia ma auai i le faʻatonutonuina o le faʻalauteleina o sela. E mafai foi e le IL-3 ona faʻagaoioia le ala o le kinase (ERK) ma le c-jun aminotransferase (JNK), faʻaosofia le tuputupu aʻe, faʻalauteleina, ma le ola o sela.

Interleukin-6 (IL-6)
IL-6 o se cytokine multidirectional e faia se sao taua i le puipuiga a le talimalo e ala i le faʻatonutonuina o tali puipuia ma faʻamaʻi. O le IL-6 e gaosia e sela T, monocytes, fibroblasts, sela endothelial, ma keratinocytes, ma e tele ana galuega faʻaola. E mafai ona faʻaleleia le eseesega o le cell B ma le gaosiga o le antibody, faʻatasi ai le IL-3 e faia se sao i le atinaʻeina o megakaryocytes ma le gaosiga o platelet, faʻaosofia le faʻaalia o polotini vaega ogaoga i le ate, ma faʻatonutonu le metabolism o ponaivi. O le IL-6 e tuʻuina atu faʻailoga e ala i le IL-6 receptor system, lea e aofia ai filifili e lua: IL-6Rα ma le gp130. O le STAT3 o le mole faʻamautu lea i le faatumauina o le tulaga e leʻi vaʻaia o sela o le embryonic stem, ae o le IL-6 o le uluai faʻalauiloaina o le JAK / STAT3 ala faʻailoga.

LFLT3 ligand (FL)
O le FLT3 ligand o se mea e tupu aʻe e faʻatonutonuina vave le faʻalauteleina o sela hematopoietic. FLT3 ligand e fusifusia i sela e faʻaalia le tyrosine kinase receptor FLT3. O le FLT3 ligand lava ia e le faʻaosofia ai le faʻalauteleina o sela hematopoietic vave, ae faʻapipiʻi faʻatasi le tuputupu aʻe ma le eseesega ma isi CSFs ma interleukins. E le pei o le SCF, o le FLT3 ligand e leai sona aafiaga i sela mast. E tele subtypes o le FLT3 ligand ua iloa. O le mea autu o le bioactive o loʻo taula i luga o le cell cell e pei o le extracellular domain o le transmembrane protein (209a.). O le isomer fusifusia membrane e mafai ona vaeluaina e polotini e maua ai isomers soluble galue biologically.

FMS-Saina Liquorice 3
O le FMS-liketyrosine kinease 3 (FL3) o loʻo faʻaalia maualuga i le CD34 + CD38dim sela e tuʻuina atu faʻailoga i le sela e ala i le fusifusia i ana tyrosine kinase active receptors (TKRs). O le FL3 e galue ile HSC/HPC ma fa'atinoina le fa'atonutonuina o le hematopoietic e ala ile fusifusia ile TKR ile luga ole sela. O le FL3 o se mea taua tele e fa'aosofia ai le fa'aosoina o le cell progenitor, lea ei ai sona aafiaga fa'alauiloa taua i le fa'alauteleina o le HSC/HPC in vitro. E mafai ona puipuia le CD34+ stem cell mai le faasolosolo malie ona fa'aeseese ma fa'aumatia le HPC a'o fa'alauteleina in vitro.

Suia o le tuputupu a'e mea- β
Fa'aliliuina o le tuputupu a'e- β 、 Fa'aliliuina o le tuputupu a'e- β 1 β 2 ma le β 3 subtypes o mamame e fa'aulu fa'ailo e ala i le tali tutusa, ma mafua ai tali tutusa o meaola. O latou o cytokines multifunctional e faʻatonutonuina le faʻalauteleina o le cell, tuputupu aʻe, eseesega, ma gaioiga, faʻapea foʻi ma le faʻapipiʻiina ma le faʻapipiʻiina o le matrix extracellular. O le suiga o le tuputupu aʻe-β (TGF-β) e gaosia e le gaʻo ponaivi stromal sela. E taofia ai le vave HSC / HPC mai le ulufale atu i le vaega S, ma mafua ai ona i ai le tele o HSC / HPC i le vaega G0.

Macrophage inflammatory protein-1 α
Macrophage inflammatory protein-1β (MIP-1β) o se faʻalavelave faʻanatura o le MIP-1α, lea e faʻatasi ma ia. E mafai ona fa'amāmā le a'afiaga ole MIP-1α ile vave ole HSC/HPC ma puipuia ai le HSC mai le toe fo'i atu ile tulaga filemu.

P38
P38, i le avea ai o se mole faʻailoga o le mitogen activated protein kinase (MAPK) aiga, faʻalavelaveina le faʻalauteleina in vitro o HSC i lalo o tulaga masani. O faʻataʻitaʻiga ua faʻaalia ai pe a faʻaopoopoina HSC i faʻasalalauga aganuʻu e leai se serum e aofia ai le TPO, SCF, ma le FL3, o le faʻamaʻi faʻamaʻi faʻamaʻi e faʻagaoioia ai le p38 ma le p16, e oʻo atu ai i se faʻaititia tele o le numera o le kiore HSCs.

Mea e fa'aosofia ai le fa'atupuina o le kolone o le granulomacrophage (GM-CSF)
Granulocyte macrophage colony-stimulating factor ose vailaʻau faʻaaogaina ile falemaʻi mo mafuaʻaga eseese ole leukopenia poʻo le granulocytopenia. O le mea o loʻo i ai nei le cell mobilization agent o le granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), e le gata ina faʻateleina le numera o sela o le hematopoietic i totonu o le toto lautele, ae fesoasoani foi i le gaioiga o le fatu ma isi galuega.

Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF)
O a'afiaga o mea e fa'aosofia ai le fa'atupuina o le granulocyte colony e masani ona aofia ai le fa'aalia o le antigen, fa'aleleia atili o le fa'aogaina o le macrophage, ma le fa'alauteleina o le fa'alauteleina o le sela o le hematopoietic. O le Granulocyte colony-stimulating factor o se sui malosi mo le faʻaogaina o sela o gaʻo ponaivi, lea e mafai ona faʻaosofia ai le faʻalauteleina o sela o le gaʻo ponaivi autologous ma faʻaosoina mai le gaʻo ponaivi i le toto lautele.

Erythropoietin (EPO)
Erythropoietin (EPO) o le autu stimulatory autu i le eseesega hematopoietic, lea e mafai ona uunaia ai le eseesega o sela o le hematopoietic stem i sela mumu muamua, faatelevaveina le vaevaega ma le faalauteleina o sela mūmū talavou, uunaia le tuufaatasia o le hemoglobin, ma faia foi se sao taua i le suʻesuʻeina o le eseesega o le toto mumu toto.
Hematopoietic stem cell e iai le gafatia mo le faʻafouina o le tagata lava ia ma le faʻavasegaina o le tele o itu. O le tu'ufa'atasiga o mea 'ese'ese e 'ese'ese a'afiaga i le fa'alauteleina o sela o le hematopoietic stem cell. O le fa'aogaina o sela o le hematopoietic e mafai ona fa'aosoina ai le gaosiga o le tele o sela, lea e mautinoa e maua ai ni manatu fou mo le fa'alauteleina o sela NK. I le taimi nei, o sela NK e mafai ona fa'aosoina mai sela fa'atosina ma iPSCs, peita'i e mana'omia ona suia uma sela fatu fa'afuafua ma fa'aoso pluripotent stem cell i sela o le hematopoietic a'o le'i mafai ona fa'avasega i sela NK. O le mea lea, o le hematopoietic stem cell e faia se alalaupapa taua i lenei faagasologa. O le lelei o sela NK e maua mai i sela fatu e mafai ona faʻaaogaina pe a manaʻomia, maua le homogeneity malosi, maualalo le faʻasaʻoina o le cytokine, ma le malosi o le fasioti tagata. O le mea lea, o lo'o i ai pea le fa'atosina maualuga mo le su'esu'eina o sela NK e maua mai sela fa'ato'aga i luga o le maketi. O lo'o iai tusitusiga e uiga i le fa'auluina o sela fa'ato'a i totonu o sela NK. Matou te taulaʻi atu i mea taua o loʻo taʻua i tusitusiga.

1. O sela NK e maua mai sela fa'aafuafua a le tagata

HESCs na siitia atu i le coculture ma murine ga'o ga'o stromal cell line M210-B4 i ala o loo i ai RPMI 1640, 15% fa'amalamalamaina fetal bovine serum, 2 mM L-glutamine, 1% nonnessential amino acids, 1% penicillin / streptomyocin, ma 0.1 mM -mercap fa'amatalaina aso uma i le 3 aso muamua. A maeʻa le 17 i le 20 aso, ona saunia lea o le faʻamalologa e tasi ma faʻaesea CD34 + CD45 + sela, e pei ona faʻamatalaina muamua. O sela faʻaesea na faʻafeiloaʻi atu i se faʻamaʻi lona lua ma le murine fetal liver-na maua mai le stromal cell line AFT024 i le ala o loʻo i ai se 1: 2 faʻafefiloi o Dulbecco faʻaleleia Eagle medium / Ham F12, 20% vevela-inactivated serum tagata AB, 2 mM L-glutamine, 1% penicillin / streptomyocin / L , sodium. ethanolamine, 25μM -mercaptoethanol, 20 mg/mL ascorbic acid, interleukin-3, stem cell factor, IL-15, Fms-like tyrosine kinase 3 ligand, ma le IL-7. Sa fafagaina sela i le ala fou e ala ile afa suiga ile 5 ile 6 aso. A maeʻa le 30 i le 35 aso i le aganuʻu, e seleseleina sela, faʻamama e ala i le 70-μm faamama, ma faʻaaoga mo suʻesuʻega atili.

2. O sela NK e maua mai i sela fa'ato'aga tele a le tagata

Matou te seleseleina 18-21 aso sela mo CD34 + CD45 + progenitor cell enrichment .E selau afe CD34 + CD45 + sela na tuʻuina i luga o le EL08-1D2 stroma ma le 1 ml o le NK cell initiating cytokines (IL-3, IL7, IL-15, stem cell factor tyrosinend fms kinase). O aganu'u NK cell na matou fa'afouina i le 0.5 ml o le cytokine-containing medium i aso uma 4-5. O sela NK matua na fuaina ile 28-35 aso ole aganuu ile EL08-1D2.

T&L stem cell cytokines & growth factor

E uiga ile T&L
T&L Biotechnology Ltd., na faavaeina i le 2011, e taulaʻi i le suʻesuʻeina ma le atinaʻeina o mea mataʻutia o le GMP i luga ma reagents o le cell and gene therapy (CGT). Matou te tuuto atu i le tuuina atu o oloa ma auaunaga faatuatuaina mo le faasaienisi o le olaga