Hapi i Parë i Komercializimit të CAR-T

Burimi: T&L Biotechnology Koha e publikimit: 2023-08-31

Si një metodë e re e imunoterapisë individuale të tumorit, CAR-T Terapia qelizore ka treguar potencial të madh terapeutik. Megjithatë, funksionimi komercial nënkupton sfida të reja. Krahasuar me kimikatet tradicionale, biofarmaceutikët "e gjallë" kanë pasiguri, probleme dhe rreziqe të mundshme më të mëdha. Kompanitë farmaceutike duhet së pari të formulojnë një sërë specifikimesh të arsyeshme testimi për të siguruar sigurinë dhe efektivitetin e produkteve CAR-T. Sot, le të hedhim një vështrim se si të sigurojmë cilësinë e produkteve CAR-T dhe të përfitojmë më mirë pacientët.

1. Aftësia e amplifikimit të qelizave CAR-T in vitro
Terapia me qeliza CAR-T kërkon së pari marrjen e limfociteve T nga trupi i pacientit dhe më pas transduktimin e domeneve të synuara CAR përmes teknologjisë transgjenike in vitro. Ky proces duhet të amplifikohet plotësisht në sistemin e kulturës qelizore për të marrë mjaftueshëm qeliza terapeutike CAR-T. Prandaj, aftësia e amplifikimit in vitro e qelizave CAR-T përcakton drejtpërdrejt nëse numri i qelizave mund të merret për të përmbushur nevojat e trajtimit. Ne mund të vlerësojmë aftësinë e amplifikimit in vitro të produkteve të qelizave CAR-T përmes numrit kumulativ të qelizave të marra përmes brezave të shumtë të kulturës, rritjes së amplifikimit të qelizave dhe kohës së kulturës së nevojshme për të vendosur numrin e qelizave [1]. Këta indekse pasqyrojnë përhapjen dhe vitalitetin e qelizave CAR-T dhe janë një nga indekset kryesore të performancës për zhvillimin e teknologjisë së qelizave CAR-T.

Fig. 1: Procesi i amplifikimit të qelizave CAR-T in vitro

2. Qëndrueshmëria e qelizave CAR-T in vivo
Koha e mbijetesës dhe qëndrueshmëria e qelizave CAR-T pas infuzionit janë gjithashtu tregues të rëndësishëm të funksionit. Qelizat CAR-T jetëgjata mund të luajnë një efekt më të qëndrueshëm në vrasjen e tumoreve. Zakonisht zbulojmë rregullisht ndryshime në numrin e qelizave CAR-T në gjakun periferik përmes citologjisë rrjedhëse për të vlerësuar qëndrueshmërinë e tyre in vivo. Në përgjithësi, mund të zbulohet vazhdimisht 1-6 muaj ose më shumë pas infuzionit. Zbulimi maksimal zakonisht ndodh 1-2 javë pas infuzionit. Është normale që numri i qelizave CAR-T të ulet me kalimin e kohës. Formulimi ideal i qelizave CAR-T duhet të ketë kohë mbijetese prej të paktën 3-6 muajsh in vivo, vetëm në këtë mënyrë mund të sigurohet një efekt terapeutik i kënaqshëm.

Fig.2: Zbulimi i qelizave CAR-T në lidhje me qëndrueshmërinë in vivo

3. Performanca e qelizave CAR-T në shënjestrimin e tumorit
Mekanizmi kryesor i terapisë me qeliza CAR-T është se limfocitet T kanë fituar afinitet të lartë për aftësinë për të identifikuar antigjenet specifike të sipërfaqes së tumorit pas modifikimit, kështu që produktet e qelizave CAR-T duhet të kenë aftësinë e qartë për të synuar qelizat tumorale. Ne mund të zbulojmë efektin vrasës të qelizave CAR-T në linjat qelizore tumorale që shprehin antigjene të synuara përmes in vitro për të gjykuar performancën e tyre të synimit. Përveç kësaj, ne gjithashtu mund të zbulojmë infiltrimin e qelizave CAR-T në indin tumoral përmes citometrisë së rrjedhës në trupin e pacientit për të parë nëse ato mund të hyjnë në mënyrë efikase në vendin e tumorit për të luajtur një funksion vrasës [3]. Qelizat ideale CAR-T duhet të jenë shumë të pasuruara në tumor.

4. Aktiviteti citotoksik i qelizave CAR-T
Pasi qelizat CAR-T i njohin dhe i aktivizojnë tumoret, ato do të lëshojnë citokina dhe grimca citotoksike të ndryshme për të sulmuar dhe vrarë qelizat tumorale. Prandaj, ne mund të zbulojmë nivelet e IFN-γ, TNF-α, perforinës, enzimës granulare dhe molekulave të tjera të lëshuara nga qelizat CAR-T për të vlerësuar aktivitetin citotoksik dhe statusin e aktivizimit të vrasjes së tumoreve [4]. In vitro, ne mund të zbulojmë përmbajtjen e citokinave dhe toksinave të mësipërme nga qelizat CAR-T të bashkë-kulturuara dhe qelizat tumorale të synuara. Eksperimenti i degranulimit gjithashtu mund të pasqyrojë në mënyrë intuitive nivelin e qelizave CAR-T që lëshojnë perforinë dhe granulazë, të cilat janë tregues të rëndësishëm për të vlerësuar aktivitetin vrasës të produkteve të qelizave CAR-T.

Fig4: Zbulimi i aftësisë së qelizave CAR-T për të vrarë qelizat cak

5. Aftësia e kujtesës së qelizave CAR-T
Qelizat ideale CAR-T duhet të kenë gjithashtu funksion kujtese, që do të thotë se ato mund të arrijnë aktivitet më të fortë pas aktivizimit të përsëritur dhe t'u përgjigjen sinjaleve të tumorit më shpejt [5]. Ne mund të zbulojmë efektet e kujtesës së qelizave CAR-T duke i stimuluar ato shumë herë in vitro, siç është rritja e nivelit të çlirimit të citokinës dhe rritja e aktivitetit vrasës. Pasi kjo qelizë CAR-T me aftësi kujtese injektohet në trup, ajo mund të arrijë një efekt vrasës më të qëndrueshëm dhe më të fortë në tumore.

Fig5: Zbulimi i qëndrueshmërisë afatgjatë të qelizave CAR-T

6. Vlerësimi i sigurisë së terapisë me qeliza CAR-T

Rreziku kryesor i terapisë me qeliza CAR-T është se mund të shkaktojë sindromën e rëndë të çlirimit të citokinës. Pra, ne duhet të zbulojmë nivelet e citokinave të lidhura me CRS, të tilla si IL-6, IL-10 dhe IFN-γ të prodhuara nga qelizat CAR-T, dhe të vlerësojmë rrezikun që terapia me qeliza CAR-T mund të shkaktojë CRS. Përveç kësaj, është e nevojshme të monitorohen efektet e tjera anësore të mundshme toksike.
Këta tregues mund të pasqyrojnë plotësisht performancën kryesore të qelizave CAR-T, duke përfshirë aftësinë e përhapjes, shënjestrimin e tumorit, aktivitetin citotoksik, qëndrueshmërinë dhe sigurinë. Vetëm produktet e qelizave CAR-T që plotësojnë njëkohësisht kërkesat dhe treguesit e mësipërm mund të luajnë një efekt të vërtetë antitumor në praktikën klinike. Prandaj, është e nevojshme të krijohet një sistem shkencor dhe i arsyeshëm i vlerësimit të cilësisë dhe të hiqen pengesat për zhvillimin e produkteve të gatshme për përdorim për zhvillimin e produkteve të qelizave CAR-T me aktivitet të lartë dhe cilësi të lartë, në mënyrë që të arrihet qëllimi afatgjatë që ul kostot dhe përmirëson efektivitetin e trajtimit në të ardhmen, dhe për të përfituar më shumë pacientë që kanë nevojë për trajtim.

Rekomandimi i produktit me yll
Si terapia më e njohur aktualisht, terapia CAR-T është miratuar për t'u listuar si produkti i tretë CAR-T në Kinë. Ndërmarrjet dhe platformat përkatëse CAR-T kanë përshpejtuar ritmin e kërkimit dhe zhvillimit dhe janë përqendruar në mënyrë aktive në paraqitjen e diferencuar. Disa ndërmarrje, përveç konkurrencës për performancën e sigurisë së produktit, është e domosdoshme që ndërmarrjet përkatëse të ulin kostot dhe të rrisin efikasitetin, dhe zëvendësimi vendas do të bëhet gjithashtu mënyra kryesore për zhvillimin industrial. Imuniteti. Rruazë magnetikeJanë lëndë të para të rëndësishme për përgatitjen e qelizave CAR-T dhe luajnë një rol shumë të rëndësishëm në procesin e ndarjes dhe aktivizimit të qelizave T. Produkti Tonglihaiyuan me nivel PMP, ActSep ® CD3/CD28 Separation & Activation Beads (numri i artikullit: GMP-TL603), integron funksionet e ndarjes dhe aktivizimit për të arritur ndarjen, aktivizimin dhe amplifikimin e qelizave T në mënyrë efikase. Është i përshtatshëm për aplikime të lidhura me qelizat T njerëzore, CAR-T dhe kultura të tjera të qelizave T. Për më tepër, produkti ka përfunduar regjistrimin e DMF Tipit II në FDA të SHBA-së (numri i regjistrimit: 038124), duke mbështetur regjistrimin dhe deklarimin e barnave qelizore.

Rruaza Magnetike të Ndarjes dhe Aktivizimit ActSep® CD3/CD28

1. Niveli i shterimit të qelizave T

Nivelet e shprehjes së LAG3 dhe PD1 zbulohen pas kulturës së aktivizimit të qelizave T për 14 ditë me raporte të ndryshme të shtimit të sferave magnetike. ActSep® është në thelb i njëjtë me atë të konkurrentëve. Shprehja e indeksit të shterimit të ActSep® është më e ulët nën raportin 3:1 të sferave magnetike për qelizë. Përveç kësaj, heqja e sferave magnetike në Ditën 5 do të ulë më tej nivelin e shterimit të qelizave T.

2. Analiza e nëntipit të qelizave T

Zbuloni ndryshimet e nëntipeve të qelizave T në pika të ndryshme të kultivimit pas aktivizimit të ndarjes ActSep®. Përqindja e Tcm rritet gjatë procesit të kultivimit, dhe raporti i Teff me Tem rritet me zgjatjen e kohës së kultivimit.

Rreth T&L
T&L Biotechnology Ltd., e themeluar në vitin 2011, përqendrohet në kërkimin dhe zhvillimin e lëndëve të para dhe reagentëve të gradës GMP për terapinë qelizore dhe gjenetike (CGT). Ne angazhohemi të ofrojmë produkte dhe shërbime të besueshme për shkencën e jetës.